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绿安康!养殖场冬季消毒的优选

时间:2022-4-15 0:20:10

北方冬天太冷,滴水成冰,养殖场消毒难,怎么办?

 

本试验找到两种溶剂,解决这个问题:一种是27%氯化钠溶液,另一种是25%氯化钙与9.5%乙醇的混合液。这两种溶剂可以有效降低冰点,气温达到-15℃时仍然可以消毒。

 

并且经过验证,这两种溶剂的使用不但没有降低绿安康的消毒效果,反而在一定程度上增强了绿安康的消毒效果。

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具体验证过程如下:

 

一、试验材料与方法:

1. 溶液组成

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1 不同试剂水溶液的凝固点和成本分析

 

2. 试验菌株

大肠杆菌标准菌株ATCC 25922,金黄色葡萄球菌标准菌株ATCC 29213。

 

3. 溶液配制

溶液1:

称取54g氯化钠溶于160mL自来水中,振荡溶解,再加自来水稀释至200mL,混匀,冷冻保存,备用。

 

溶液2:

称取50g氯化钙溶于160mL自来水中,振荡溶解,加无水乙醇19mL,再加自来水稀释至200mL,混匀,冷冻保存,备用。

 

0.03mol/L 磷酸盐缓冲溶液(PBS):

称取十二水磷酸氢二钠3.58 g和磷酸二氢钾1.36 g溶于800 mL纯化水,振荡至完全溶解后,调节pH至7.2,再加纯化水稀释至1 L,于121℃高压灭菌15 min,备用。

 

1%中和剂(1%硫代硫酸钠溶液):

称取五水硫代硫酸钠15.73 g溶于1 L 0.03 mol/L PBS(pH=7.2),振荡溶解,于121℃高压灭菌15 min,备用。现用现配。

 

绿安康溶液:

分别以溶液1和溶液2为溶剂,配制浓度为1:100的绿安康溶液,振荡溶解后备用。

 

4. 试验菌液制备

将新增殖的菌液用0.03 mol/L PBS稀释,使试验菌液的含菌量约5×106CFU/mL,冷藏保存,备用。

 

5. 试验步骤

1)5个10 mL塑料离心管排列于试管架上,分别于第2~5管加灭菌水2.5 mL。于第1管加浓度为1:100的绿安康溶液5mL,取2.5 mL至第2管,混匀后再从第2管取2.5 mL至第3管,混匀后取2.5 mL弃去,使第1~3管中绿安康的浓度分别为1:100、1:200、1:400。第4管只加试验菌液不加消毒液,作为阳性对照管;第5管只加灭菌水作为阴性对照。

 

2)分别于第1~4管加入试验菌液2.5 mL,使每管中含菌量为106CFU/mL,绿安康溶液的终浓度依次为1:200、1:400和1:800。第5管加灭菌水2.5 mL。试验菌液与绿安康溶液混合后,立即置于含冰袋的保温箱中保存,并于混合后的不同时间点取样检测。

 

3)保温箱中3.5.2项下的混合液分别于混合后5min、10min和30 min时,从每管中各取0.5 mL加入至含4.5 mL中和剂的试管内,混匀,室温条件下中和10 min,取0.5 mL加入含4.5 mL TSB培养基的试管内,置37℃恒温培养24小时,观察各试管中细菌生长情况。

 

4)结果判定方法:

培养24h后,观察培养基中细菌生长情况。如果培养基发生浑浊,表示有细菌生长;如果培养基仍然澄清,表示没有细菌生长。以没有细菌生长管对应的消毒液的最低浓度为最低有效杀菌浓度,没有细菌生长管的最短消毒时间为该浓度条件下杀菌的最快有效时间。

 

二、试验结果:

绿安康溶液分别与大肠杆菌、金黄色葡萄球菌分别作用5min、10min和30min后,不同条件下细菌生长情况如表2和表3所示。

 

2  低温条件下绿安康的不同溶液对大肠杆菌的杀灭结果

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 低温条件下绿安康的不同溶液对金黄色葡萄球菌的杀灭结果

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(注:“+”表示有细菌生长,“-”表示无细菌生长;数字6指本试验重复了6次。)

 

2可以看出,在低温条件下,作用5min时,绿安康分别在溶液1和溶液2中对大肠杆菌的有效杀菌浓度为1:800。也就是说,分别用溶液1和溶液2中溶解绿安康,只需要1:800的浓度,只需要5分钟即可对大肠杆菌起到明显的杀灭作用。对照组需要1:200的浓度条件,作用10分钟可以将大肠杆菌杀灭完全。

 

3可以看出,在低温条件下,作用5min时,绿安康分别在溶液1和溶液2中对金黄色葡萄球菌的有效杀菌浓度为1:800。也就是说,分别用溶液1和溶液2中溶解绿安康,只需要1:800的浓度,只需要5分钟即可对金黄色葡萄球菌起到明显的杀灭作用。对照组需要1:400的浓度条件,作用5分钟可以将金黄色葡萄球菌杀灭完全。

 

三、结论

该结果表明,冬季天气寒冷的情况下,以溶液1和溶液2为溶剂配制的绿安康溶液,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有比较理想的杀灭效果,最低有效杀菌浓度为1:800。该2种溶剂不但没有减弱绿安康的消毒效果,反而在一定程度上增强了绿安康的消毒效果。

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(图片来源网络,侵删)

 

考虑到养殖场临床使用成本,冬季天气寒冷时,推荐使用成本相对较低的27%氯化钠溶液作为溶解绿安康的溶剂,对养殖场室外环境进行有效消毒。


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